唾液可的松|皮质醇检测技术服务
唾液检测简介唾液是一种复杂的混合物,不仅含有各种蛋白质,还含有 DNA、RNA、脂肪酸以及各种微生物等。研究发现,血液中的各种蛋白质成分同样存在于唾液中,唾液能反映出血液中各种蛋白质水平的变化。因此,就有可能通过唾液的检测来进行疾病的诊断。
随着社会的进步,生活水平的不断提高,人们对医学检查的要求也越来越高,要求无创、简便的检查诊断方法。因而唾液标本受到广大研究者的普遍关注。与血清标本相比,唾液采集安全方便,无,无血源性疾病传播的危险,患者无痛苦,易于接受。
唾液可的松检测项目
通用名称:唾液可的松检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Salivary Cortisol ELISA
规格:96T
型号:slv2930
预期用途: 试剂盒用于唾液中活性游离可的松的定量检测。
【唾液皮质醇项目简介】皮质醇在人体机能中有着很重要的作用。皮质醇的水平与压力存在着很大的相关性。皮质醇是一种由肾上腺分泌的类固醇荷尔蒙激素。它在机体中的功能包括的及调节人体的蛋白质、碳水化合物和脂肪都扮演着重要角色。机体通过皮质醇分泌量的增加以应答身体上任何压力,无论是物理上的(如疾病、、手术或*温度)还是心理上的。皮质醇的分泌会引起肌肉蛋白质的分解,使释放出的氨基酸进入血液中这些氨基酸被运送到*中合成葡萄糖以提供能量。这个过程被称之为糖异生。这一过程提高了水平,所以大脑将会有更多的葡萄糖提供能量。同样,皮质醇也会导致脂肪酸的释放,一种来源于脂肪细胞的能量以提供肌肉使用。
皮质醇水平升高和缺乏的昼夜变化已确认与(促肾上腺皮质激素分泌过多)有关。循环皮质醇水平的身高也在患有肾上腺瘤的身上被确认。低水平的皮质醇在原发性肾上腺功能不全(例如:肾上腺发育不全、阿狄森氏病)和促肾上腺皮质激素缺乏上被确认。由于皮质醇水平是随着昼夜变化的,所以正常和异常的皮质醇水平是很难区分的。因此建议连续收集几日的样本进行检测。唾液因其是血液的一种自然超滤液而成为检测类固醇的一个很好的介质。
【唾液皮质醇检测原理】该试剂盒是基于竞争法的酶联免疫吸附检测试剂盒。微孔板中包被有单*抗体,样品中的可的松与HRP标记的可的松竞争。洗板后,加入底物液温育,之后再加入终止液。所结合的酶联物的量与样品中的可的松浓度成反比。
【唾液皮质醇试剂盒组成成分】
1、微孔板——12×8——包被有可的松抗血清
2、标准品(SD 0-6)——7×1ml——浓度0 - 0.1 - 0.5 - 1.5 – 4 – 10 - 30 ng/mL
3、高/低质控品——2×1ml——即用型、具体浓度见质控单
4、酶联物——1×26ml——即用型 含HRP标记的可的松
5、底物液——1×25ml——即用型 含TMB
6、终止液——1×14ml——即用型 含0.5M 硫酸
7、洗涤液(40×)——1×30ml
所需材料(未提供)
酶标仪
移液器
吸水纸
蒸馏水
计时装置
试管
坐标纸或自动计算软件
【储存条件】未开封的试剂盒保存在2~8℃下,效期内有效。不要使用过期试剂。开启过的试剂需保存在2~8℃下,微孔板必须储存在2~8℃,一旦撕开,需小心密封好。
【样品要求】
样本采集采集样本前的30分钟内,应避免进食、饮水、嚼口香糖以及刷牙。推荐在采样前5分钟,使用冷水冲洗口腔一次。当有口腔疾病、发炎或口腔受到损害(血液污染)时,请勿采样。(含Sodium azide的样本不能用于检测)推荐在饭前的2~3个小时内采集5份样本。
样品保存2~8℃下一周有效、要保存更长时间需储存在-20℃、反复冻融不会对实验结果造成影响。每个样本必须被冻结、解冻和离心至少一次以除去黏蛋白。所采集的样本必须在深低温下保存至少一夜,然后室温下溶解,离心5~10分钟(2000~3000g)。所得上清液可用于实验检测。将5份处理过的样本混合。
样品稀释
样本浓度高于*标准品,则使用标准品0对样本进行稀释。
结果需乘以稀释因子
推荐稀释比
a)1:10 10μl样品+90μl标准品0
【唾液皮质醇检测方法】
30ml+1170ml蒸馏水,混匀
室温下2周稳定
检测开始前将试剂盒所有组分稳定至室温
检测步骤
1、标准品、质控品、样品各100μl到相应的孔中。
2、每孔加20μl酶联物,混匀10秒钟。
3、室温下温育60分钟(建议该过程在300rpm的摇床上进行)。
4、倒出孔内液体,每孔400μl洗涤液洗板5次。
5、加入20μl底物液。
6、室温下温育30分钟。
7、每孔加入100μl终止液。
8、加入终止液后,10分钟内450nm下读取吸光值。
【唾液皮质醇结果计算】
1.标准品的浓度设为X轴,吸光值为Y轴,在坐标纸上绘制标准曲线。样品的浓度可以直接在标准曲线上读出
2.自动计算:采用四参数逻辑函数的进行计算
标准示例
标准品 (ng/ml) | 吸光值 |
标准品0(0 ng/ml) | 2.00 |
标准品1(0.1 ng/ml) | 1.89 |
标准品2(0.5ng/ml) | 1.62 |
标准品3(1.5 ng/ml) | 1.22 |
标准品4(4.0 ng/ml) | 0.75 |
标准品5(10 ng/ml) | 0.40 |
标准品6(30 ng/ml) | 0.18 |
唾液皮质醇检测项目
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