登 革热IgM试剂盒(酶联免疫法)
通用名称:登 革热IgM试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Dengue virus IgM ELISA
产品规格:96T
预期用途
登 革热IgM试剂盒可用于人血清中抗登 革热病毒IgM抗体的定性检测。
检测原理
抗登 革热病毒IgM抗体的定性酶免 检测利用的是ELISA技术。包被板上预先包被了结合样品相关抗体的登 革热病毒2型抗原。洗板除去未结合的样品物质后,加入辣根过氧酶标记的抗人IgM酶联物。这一酶联物可与捕获到的登 革热病毒特异性抗体结合。加入能产生蓝色反应产物的TMB底物液后,如果显示蓝色则可知已形成免疫复合物。所显示颜色的强度与样品中登 革热病毒特异性IgM抗体的量成正比。加入硫酸以终止反应,以便产生黄色的终点颜色。用一酶标仪在450m处读取OD值。
登 革热IgM试剂盒组成成分
◆包被板(IgM):12×8可拆板条,包被有登 革热2型抗原,真空密封于铝铂金属袋中。
◆IgM样品稀释液:1瓶,内含100ml样品稀释用缓冲液,pH7.2±0.2,液体为绿色,待用,白盖。
◆终止液:1瓶,内含15ml硫酸,0.2mol/l;待用,红盖
◆洗涤液(20×浓缩):1瓶,50ml,含20倍浓缩的样品洗涤液,pH7.2±0.2,白盖
◆酶标物:1瓶,含20ml,红色,待用,黑盖。
◆底物液:1瓶,含15mlTMB,待用,黄盖。
◆阳性质控:1瓶,2ml;黄色,待用,红盖
◆临界质控:1瓶,3ml;黄色,待用,绿盖
◆阴性质控:1瓶,2ml;黄色,待用,蓝盖
检测步骤
请至少做以下几个孔:
1孔(例A1)做空白对照孔,1孔(例B1)做阴性质控。
2孔(例C1+ D1)做临界质控,1孔(例E1)做阳性质控。
1)控品和已稀释好的样品分别100μl加入到相应的微孔中,留下A1做空白对照孔。
2)盖板。
3)37±1℃下温育1h±5min
4)温育后,移去粘性金属板,弃取孔内反应液,用300μl洗涤液洗板3次。避免反应孔中的液体溅出。每次洗板间的浸润时间都应大于5秒。*在吸水纸上拍干。
5)除空白孔外,在每一微孔中都加入100μl登 革热抗IgM酶标物,盖板。
6)室温下温育30min,避免太阳直射
7)重复步骤4
8)在每一微孔中加入100μlTMB底物液
9)室温下(20-25℃)避光温育15min
10)按加TMB底物液的顺序和速度在每一微孔中加入100μl终止液。
温育之后,包被板内试剂的颜色由蓝色变为黄色
11)加终止液后30min之内在450/620nm处读取OD值。
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