嗜肺军团菌(尿)抗原ELISA
中文名称:嗜肺军团菌(尿)抗原ELISA
英文名称:Legionella pneumophila (urine) antigen ELISA
产品规格:96T
预期用途
嗜肺军团菌 尿液抗原试验可用于人尿液中军团菌抗原的体外定量检测,用于辅助培养的方法对既往或发 病期军团病进行预期诊断。
前言
嗜肺军团菌与1976年肺 炎大爆发后在美国退伍军人协会*被分离出来,因此命名为军团菌疾病。用传统实验室方法来检测由嗜肺军团菌感染引起的肺 炎需要充足的呼 吸道样本(如痰、呼 吸道洗液、肺活检)或者是已配对的血清样本(重 症或康复中的血清样本)以便准确检测。
使用这种方法来确诊嗜肺军团菌取决于适当的样本收集和可用的专业技术水平。大约80%军团菌肺 炎患者尿液中可分泌军团菌抗原。这对于在尿样中检测军团菌抗原提供很大的帮助。对于收集、运输和所有疾病样本的诊断来说,尿液是*的检测样本。
实验原理
利用双抗体夹心ELISA原理,用抗嗜肺军团菌抗体捕获尿中的抗原。联结辣根过氧化物酶(HRP)的第 二个抗体结合至反应板上形成复合物。通过加入TBM显蓝色来指示尿中存在嗜肺军团菌抗原。
嗜肺军团菌(尿)抗原ELISA试剂组成
包被板 |
96T,微孔中包被了纯化的兔抗嗜肺军团菌IgG抗体 |
酶联物 |
1x11ml,即用型 |
阳性质控 |
1x2ml,内含硫柳汞的嗜肺军团菌抗原 |
阴性质控 |
1x2ml,内含硫柳汞的稀释缓冲液 |
显色剂 |
1x11ml,内含TMB和过氧化物 |
浓缩洗涤液 |
1x25ml,内含浓缩的洗涤液和表面活性剂 |
终止液 |
1x11ml,磷酸 |
实验所需器材但试剂盒不提供
1、蒸馏水或去离子水、量筒、吸量管、吸水纸和毛巾。
2、洗板用塑料挤瓶
3、洗板机
4、有450nm和620-650nm滤光片的酶标仪
样本收集和准备
1)尿液样本要在标准的,无菌的容器中收集。
2)将它储存于室温或2-8℃冷藏,采集后24小时内进行检测。
3)另外,样品2-8℃可保存14天,更长时间需-70℃冻存。
4)只要可能,在运输尿液样本时储存与2-8℃或冻存。
5)含过量尿酸盐、磷酸盐或其它可溶性盐的尿液储存于8℃或更低温度时会出现结晶。
6)实验开始前确保所有样品都平衡到了室温。
检测步骤
1) 将1瓶20倍浓缩的洗涤液加入到500ml蒸馏水中,充分混合。
2) 将所需数目的板条置于板架上。所有未使用的都要装回袋中,并密封好。
3) 加两滴(100μl)阴性质控到孔1中。
4) 加两滴(100μl)阳性质控到孔2中。
5) 加100μl尿液样本到每个测试孔。
6) 室温(15-25℃)温育30分钟,之后洗板
7) 每孔加两滴(100μl)酶联物
8) 室温温育10分钟,之后洗板
9) 每孔加两滴(100μl)显色液,室温温育5分钟,此步骤后不要洗板。
10) 每孔加2滴(100μl)终止液,轻敲板的边缘,使充分混合。
11) 在波长450nm/620-650nm处读取吸光度(OD),对空气读数调为零。
代理商:深圳市科润达生物工程有限公司
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