登 革热IgG/IgM检测试剂盒(酶联免疫法)
通用名称:登 革热IgG/IgM检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Dengue IgG/IgM ELISA Kit
产品规格:96T
预期用途
试剂盒可用于定性检测人血清中抗登 革热IgG/IgM抗体。
前言简介
登 革热病毒属于黄病毒科,它包括有4种血清型。日本脑 炎和黄热病也属于是黄病毒科。由于共同的抗原决定簇的存在,黄病毒科间常出现交叉反应。即使登 革热病毒的4种不同血清型之间也存在有交叉反应。
登 革热病毒不同血清型之间不存在有交叉防护,因此在感染一种血清型的登 革热病毒后,不会出现对另外一种血清型的防护。这种情况的再次感染通常会导致更加严重的病 症,如登 革热病毒出血 热。登 革热病毒感染可能会导致不同的疾病,包括轻微的发 烧到登 革热出血 热,甚至是登 革热休克综合征。通常感染后的5~8个孵育期,会出现有恶 心、呕吐、怕冷、剧 烈头 痛、皮疹以及淋 巴结肿 大。大约10%的感染者会出现血 管损 伤并导致之后的死亡。
不同的感染阶段会出现不同的抗体。初次感染后(发 病 后5~6天),*检测到的抗体是抗病 毒衣壳蛋白的IgM抗体。这种抗体会在1~2个月后逐渐的减少。继 发感 染中,发 病14天后则会出现IgG抗体。尽管在继 发感 染中,IgM抗体同样也会出现,但是它们会逐渐的消散,而IgG抗体会持续存在,甚至是保持高滴度。初次感染中,病 人会有很高的IgM/IgG的比率。继 发感 染中的IgG抗体水平尤其的高。抗体滴度的持续增加以及高的IgM水平都暗示着急性感染或者近期感染。使用该试剂盒检测IgM抗体时,应注意先除去IgG抗体,因为这些抗体的存在会降低试剂盒的灵敏度。
检测原理
微孔板中包被有登 革热病毒1~4型的纯化抗原。病 人血清加入到微孔板中进行温育,如果有相应的抗体存在,则会与微孔板上的抗原相结合。之后,洗板洗去未结合的成分,加入酶联物,酶联物会与这些抗体相结合。洗板,加入底物液,颜色变为蓝色。加入终止液后,液体由蓝色变为黄色。使用酶标仪读取吸光值或者通过目测比较检测结果。
试剂盒组成成分
微孔板:12×8T,包被有登 革热病毒1~4型的纯化抗原
酶联物:1×11ml,含HRP标记的抗人IgG/IgM
阳性质控:1×1ml,含稀释过的人阳性血清
阴性质控:1×1ml,含稀释过的人阴性血清
底物液:1×11ml,即用型
终止液:1×11ml,含1M的硫酸
稀释液:2×30ml,含蛋白缓冲液
洗涤液:1×25ml20倍浓缩
所需材料(未提供)
1.移液器
2.洗板机
3.蒸馏水
4.样品稀释管
5. 吸水纸
6.酶标仪
检测步骤
1、移取100ul质控品及稀释好的样品至相应的微孔中
2、室温(15~25℃)温育10分钟
3、弃去孔内液体,使用洗涤液洗板3次
4、每孔加入2滴酶联物
5、室温温育10分钟
6、弃去孔内液体,使用洗涤液洗板3次
7、每孔加入2滴底物液
8、室温温育5分钟
9、每孔加入2滴终止液
10、1小时内使用酶标仪读取吸光值
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