尿液Titin N片段——无创性肌肉损伤潜在生物标记物

Titin（肌联蛋白）是一种蛋白质，由34,350个氨基酸组成，在横纹肌中特异性表达。人肌联蛋白的分子量为3,816 kDa，是生物体内现有蛋白中最大的蛋白，是肌小节结构蛋白之一，是肌原纤维蛋白的最小单位，具有作为肌原蛋白的功能。弹性蛋白可通过收缩来恢复缩短的肌节的长度。

众所周知，如果肌肉受损，则肌蛋白会被钙蛋白酶和基质金属蛋白酶等蛋白水解酶裂解。Titin N-Fragment，这些片段之一，是26kDa N-terminus片段，被排泄到尿液中，因此，我们认为Titin片段是可靠且无创性肌肉损伤生物标记物的有希望的候选者。在肌肉营养不良，运动医学，心脏病，NAFLD，肌肉减少症和体弱领域进行了研究，被认为是反映肌肉状态的分子。

1. NAFLD（非酒精性脂肪肝）与非NAFLD，肥胖症，糖尿病患者相比，NAFLD患者的尿中Titin N片段水平升高。据报道，肌肉减少是NAFLD患者发展NAFLD和肝纤维化的风险，而肌肉增加与NAFLD病理状况的改善有关。

尿中TiN-N片段的水平是：

1）随着年龄的增长而增加，但男女之间没有区别。

2）与骨骼肌质量和膝盖伸展力量呈负相关。

3）与肌肉回声强度，肌外脂质和肝纤维化评分（NAFLD纤维化评分，FIB-4指数）呈正相关。

4）与NAFLD患者的肝病理状况密切相关，因为多变量分析显示，骨骼肌质量指数，腿部骨骼肌质量，肝硬度，NAFLD纤维化评分受尿中Titin-N片段水平的影响。

2. ICU-AW（获得性肌无力）是一种由肌力，肌肉质量下降和/或神经病组成的疾病，见于ICU的重症患者。由于其对出院后生活质量和长期预后的影响，这种健康疾病引起了紧急和重症监护医学的广泛关注。但是，到目前为止，还没有有效的ICU-AW生物标志物。鉴于Titin N片段最近在心脏病，肝病和运动医学中得到报道，因为它反映了尿液中的肌肉损伤。

该报告显示，日立综合医院重症监护病房（ICU）的重症患者尿Titin N片段水平较高，并且在观察期间该水平持续较高，所有这些患者的CT均显示肌肉质量明显下降。有趣的是，该报告表明，Titin N片段可能是ICU-AW中肌肉损伤的一种新颖而有用的标记。

Titin（N片段）ELISA检测试剂盒性能：

1. 用于人和大鼠尿液中Titin肌联蛋白（N片段）的定量检测。

2. 采用夹心法，包被有小鼠抗Titin-N(144A2)的IgG抗体。

3. 酶联物是HRP标记的小鼠抗Titin-N(53A1)的IgG抗体。

4. 分析灵敏度：27.91 pmol/L

5. 检测范围：46.88～3000 pmol/L

6. 实验时间：60+60+30min

7. 精密度：批内精密度≤8.6%，批间精密度≤7.7%

8. 适用于自动化开放式ELISA系统

参考文献：Maruyama N, Asai T, Abe C, Inada A, Kawauchi T, Miyashita K, Maeda M,Matsuo M, Nabeshima Y. Establishment of a highly sensitive sandwich ELISA for the N-terminal fragment of titin in urine. Sci Rep. 2016 Dec 19; 6: 39375

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